2024年12月18日，复旦大学上海医学院蔡国响教授团队在《Journal of Hematology & Oncology》期刊（IF=295）上发表了题为“myCAF衍生的外泌体PWAR6通过改变肿瘤微环境中的谷氨酰胺可用性及NK细胞功能加速结直肠癌肝转移”的研究论文。本研究揭示了肌成纤维细胞（myCAFs）衍生的外泌体LncRNA PWAR6在调节肿瘤微环境（TME）中谷氨酰胺可用性方面的重要作用，并阐明了PWAR6如何通过改变谷氨酰胺代谢和影响NK细胞功能加速结直肠癌（CRC）的肝转移。靶向抑制PWAR6结合FAPI治疗在临床前模型中有效减少肝转移，展现出良好的治疗潜力。值得一提的是，尊龙凯时生物科技公司为本研究提供了三个过表达质粒：HA-ubiquitin、Myc-NRF2和Flag-Keap1。

### 研究成果

#### 1. myCAFs增强CRC细胞的干细胞性并促进迁移

为探讨癌症相关成纤维细胞（CAFs）在结直肠癌（CRC）中的角色，研究者通过GSE166555和GSE178318单细胞测序数据分析发现，肝转移性CRC患者（CRLM）中CAFs的比例高于无肝转移患者（LM）。其中myCAFs在CRLM中显著升高，而其它类型CAFs的变化不明显。建立myCAF评分后，发现评分较高的患者多为III期及IV期CRC患者，并且预后明显较差。

#### 2. myCAF衍生的外泌体PWAR6促进CRC的干性和转移

外泌体是myCAFs与TME其他成分沟通的主要载体。研究表明，myCAF衍生的外泌体（CAF-Exo）显著促进CRC细胞干性及其迁移能力。研究人员提取外泌体进行RNA测序，发现lncRNA PWAR6在myCAF-Exo中的表达显著上调，与CRC细胞的迁移和干性密切相关。

#### 3. exo-PWAR6在CRC患者中的表达及其临床意义

应用68Ga-FAPI正电子发射断层扫描技术，研究者分析了不同SUVmax值患者组织中的PWAR6表达。发现SUVmax值升高的患者PWAR6表达显著增加，并与不良预后呈正相关，这显示PWAR6可能成为CRC的潜在生物标志物。

#### 4. myCAF来源的exo-PWAR6通过上调SLC38A2增强CRC细胞的谷氨酰胺摄取

研究发现myCAF与正常成纤维细胞（NF）在谷氨酰胺代谢途径中存在重大差异。myCAF衍生的exo-PWAR6通过调节SLC38A2表达促进CRC细胞对谷氨酰胺的摄取，强化肿瘤细胞的生长和转移能力。

#### 5. PWAR6阻断NRF2泛素化和降解

通过质谱分析确定NRF2为与PWAR6相互作用的关键蛋白。研究结果显示，PWAR6可稳定NRF2，从而增强其对SLC38A2的转录调控，进而促进谷氨酰胺的摄取。

#### 6. NRF2通过转录调节SLC38A2促进CRC细胞对谷氨酰胺的摄取

进一步研究表明，NRF2作为转录因子调控SLC38A2的表达，提升CRC细胞对谷氨酰胺的吸收，支持肿瘤细胞的生长。

#### 7. PWAR6介导的NK细胞谷氨酰胺缺乏促进肿瘤免疫逃逸

研究发现PWAR6通过增强TME中CRC细胞对谷氨酰胺的摄取导致NK细胞的活性下降，可能是其促进肿瘤免疫逃逸的机制。

#### 8. PWAR6是CRC的潜在治疗靶点

基于PWAR6在CRC中的关键作用，研究者评估了其作为治疗靶点的潜力。研究显示，利用靶向PWAR6的抑制剂（ASO-PWAR6）能有效减轻肿瘤负担，显示出其作为结直肠癌潜在治疗靶点的前景。

### 结论

总之，本研究揭示了myCAF来源的外泌体PWAR6在增进CRC细胞干性、迁移以及谷氨酰胺代谢中的重要作用，强调了PWAR6在TME中的免疫逃逸机制。作为潜在治疗靶点的PWAR6，其抑制剂ASO-PWAR6在小鼠模型中表现出显著疗效，值得在今后研究中进一步探讨其临床价值与应用。